您當前的位置:檢測資訊 > 科研開發

化學發光免疫分析儀的研發與檢測標準

嘉峪檢測網        2019-07-02 16:09

產品概述

1.1產品名稱

通用標準名稱:全自動/半自動化學發光免疫分析儀

英文名:Automatic Luminescence Immunoassay Analyzer /  Semi-automatic Chemiluminescence Immunoassay Analyzer

相關產品:配套使用試劑,通常為XX檢測試劑(化學發光法)

 

1.2產品簡介

1.2.1適用范圍

該產品采用××法,與配套的檢測試劑共同使用,在臨床上用于對來源于人體的×××樣本中的被分析物進行定性或定量檢測,包括××××項目。其中,××法應當依據申報產品采用的發光劑類型寫明具體方法,如基于吖啶酯的直接化學發光法、基于AMPPD和堿性磷酸酶的間接化學發光法;(×××包括血清、血漿、尿液、腦脊液等臨床分析常見的樣本類型,應當根據研究資料的具體結果明確寫明申報產品適用的樣本類型;××××項目應當根據研究資料的具體結果寫明申報產品可以檢測的被分析物的大類名稱,如激素、腫瘤相關抗原、感染性疾病、變應原相關項目等。(大類名稱可根據《醫療機構臨床檢驗項目目錄(2013年版)》所載內容進行描述。))

1.2.2產品類型

1)一般為臺式或者落地式。

2)按自動化程度可以分為全自動和半自動。

1.2.3典型結構

   一般由主機和上位機軟件兩部分組成。其中主機為儀器的運行反應測定部分,主要由材料配備模塊、液路模塊、溫度控制模塊、機械傳動模塊、光路檢測模塊、電路控制模塊等組成。材料配備模塊包括反應杯、樣品盤、試劑盤、清洗液、廢液等在儀器上的貯存和處理裝置;液路模塊包括過濾器、密封圈、真空泵、管道、樣本探針及試劑探針等;溫度控制模塊包括孵育器等;機械傳動模塊包括傳感器、運輸軌道、機械臂等;光路檢測模塊包括光電倍增管(Photomultiplier,PMT);電路控制模塊包括電源和線路控制板。計算機為儀器的核心部分和控制中心,主要包括計算機和隨機軟件,主要用于儀器的程控操作、檢測結果的數據處理和指示判定。

1.2.4工作原理

化學發光免疫分析含有免疫分析和化學發光分析兩個系統。免疫分析系統是將化學發光物質或酶作為標記物,直接標記在抗原或抗體上,經過抗原與抗體反應形成抗原一抗體免疫復合物。化學發光分析系統是在免疫反應結束后,加入氧化劑或酶的發光底物,化學發光物質經氧化劑的氧化后,形成一個處于激發態的中間體,會發射光子釋放能量以回到穩定的基態,發光強度可以利用發光信號測量儀器進行檢測。根據化學發光標記物與發光強度的關系,可利用標準曲線計算出被測物的含量。

1.2.4.1化學發光免疫分析法的類型

化學發光免疫分析法根據標記物的不同可分為三大類,即化學發光免疫分析、化學發光酶免疫分析和電化學發光免疫分析法。

1.2.4.1.1 化學發光免疫分析

化學發光免疫分析是用化學發光劑直接標記抗體或抗原的一類免疫測定方法。目前常見的標記物主要為魯米諾類和吖啶酯類化學發光劑。

(1)魯米諾類標記的化學發光免疫分析:魯米諾類物質的發光為氧化反應發光。在堿性溶液中,魯米諾可被許多氧化劑氧化發光,其中H2o2最為常用。因發光反應速度較慢,需添加某些酶類或無機催化劑。酶類主要是辣根過氧化物酶(HRP),無機類包括O3、鹵素及Fe3 、Cu2 、Co2 和它們的配合物。早期主要用于無機物和有機生物小分子的測定,靈敏度因標記后發光強度降低而降低。人們發現發光體系中加入某些酚類及其衍生物、胺類及其衍生物和苯基硼酸衍生物對體系的發光均有顯著增強作用,發光強度可提高1000倍,并且“本底”發光顯著降低,發光時間也得到延長。這些增強劑的使用,使化學發光免疫分析在蛋白、核酸分析領域得到廣泛的應用。

(2)吖啶酯類標記的化學發光免疫分析:吖啶酯用于CLIA由于熱穩定性不是很好,經研究合成了更穩定的吖啶酯衍生物。在H2o2和OH一條件下,吖啶酯類化合物能迅速發光,量子產率很高,如吖啶芳香酯的量子產率可達0.05,吖啶酯作為標記物用于免疫分析,發光體系簡單、快速,不需要加入催化劑,且標記效率高,本底低。這些特點引起廣大分析診斷工作者的極大興趣。

1.2.4.2 化學發光酶免疫分析

化學發光酶免疫分析(Chemiluminescent enzymeimmunoassay,cLEIA)屬酶免疫分析,只是酶反應的底物是發光劑,操作步驟與酶免分析完全相同:以酶標記生物活性物質進行免疫反應,免疫反應復合物上的酶再作用于發光底物,在信號試劑作用下發光,用發光信號測定儀進行發光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP )和堿性磷酸酶(ALP),它們有各自的發光底物。HRP最常用發光底物是魯米諾及其衍生物。在CLEIA中,使用過氧化物酶標記抗體,進行免疫反應后,利用魯米諾作為發光底物,在過氧化物酶和起動發光試劑(NaOH和H2o2)作用下魯米諾發光,酶免疫反應物中酶的濃度決定了化學發光的強度。此傳統的化學發光體系(HRP-H2O2-LUMINOL)為幾秒內瞬時閃光,存在發光強度低、不易測量等缺點。后來,在發光系統中加入增強發光劑,以增強發光信號,并在較長的時間內保持穩定,便于重復測量,從而提高分析靈敏度和準確性。

堿性磷酸酶(ALP)已廣泛用于酶聯免疫分析和核酸雜交分析。堿性磷酸酶和1,2.二氧環乙烷構成的發光體系是目前最重要、最靈敏的一類化學發光體系。這類體系中具有代表性的是ALP-AMPPD發光體系。在溶液中AMPPD的磷酸酯鍵很穩定,非酶催化的水解非常慢,在pHl2的0.05 mol/L碳酸鈉緩沖溶液中,分解半衰期可達74年,幾乎沒有試劑本身的發光背景。AMPPD為磷酸酯酶的直接發光底物,可用來檢測堿性磷酸酶或抗體、核酸探針及其他配基的結合物。ALP-AMPPD發光體系具有非常高的靈敏度,對標記物ALP的檢測限達10-21 mol,是最靈敏的免疫測定方法之一。對AMPPD加以改進,獲得具有更好反應動力學和更高靈敏度的新一代產物:CSPD、CDP-Star。這些體系已廣泛用于各種基因、病原體DNA的鑒定。

1.2.4.3 電化學發光免疫分析

電化學發光免疫分析(Electrochemiluminescence,ECL)是指由電化學反應引起的化學發光過程。ECL的反應在電極表面進行,發光底物為三聯吡啶釕[Ru(byp)2+3 ],三丙胺(TPA)用來激發光反應。在陽極表面,兩種物質同時失去電子。在電極板上Ru(byp)2+3 被氧化成Ru(byp)3+3,TPA也被氧化成陽離子自由基(TPA+# ),TPA+#自發地釋放一個質子而變成非穩定分子(TPA* ),將一個電子遞給Ru(byp)3+3,形成激發態的Ru(byp)2+3。Ru(byp)3+3在衰減的同時發射一個波長為620NM的光子,重新回到基態Ru(byp)2+3。這一過程在電極表面反復進行,產生高效、穩定的連續發光,并不斷增強。

ECL的突出優點是:①標記分子小,可實現多標記,標記物非常穩定;②發光時間長,靈敏度高;③光信號線性好,動力學范圍寬,超過6個數量級;④可重復測量,重現性好;⑤可實現多元檢測和均相免疫分析;⑥快速,完成一個樣品的分析通常只需18 min;⑦可實現全自動化。由于電化學發光免疫分析具有優越性,是一種很有發展前途的免疫分析法,日益受到人們的重視,目前已廣泛應用于抗原、半抗原及抗體的免疫檢測。

1.2.4.2化學發光分析部分

無論基于何種化學發光免疫原理和免疫反應模式,其最終結果均需要通過光檢測裝置檢測反應的光強度,通過隨機軟件和計算機將發光強度轉化為被分析物的濃度。目前,常見的光檢測裝置為光電倍增管,隨著光電子技術的不斷發展,今后可能會有其他光檢測裝置應用于全自動化學發光免疫分析儀上。

1.2.5產品特點

1)發光種類較多,可使用的方法和發光物質類型可選擇性比較多

2)反應過程中標記物看是否需要分離可分為均相反應和非均相反應

3)分離方式可分為:固相分離、過濾分離、珠式分離、順磁性顆粒分離等方式實現游離標記物和免疫復合物標記物的分離

 

5技術要求

參照以下標準編寫:

YY/T 1155-2009 《全自動發光免疫分析儀》

YY/T 1174-2010半自動化學發光免疫分析儀

 

6主要參考技術標準或規范

6.1相關國家和行業標準 

標準編號

標準名稱

GB 4793.1

《測量、控制和實驗室用電氣設備的安全要求 第1部分:通用要求》

YY 0648

《測量、控制和實驗室用電氣設備的安全要求 第2-101部分:體外診斷(IVD)醫用設備的專用要求》

GB 4793.9

《測量、控制和實驗室用電氣設備的安全要求 第2-081部分:實驗室用于分析和其他目的自動和半自動設備的特殊要求》

GB/T 18268.1

《測量、控制和實驗室用的電設備 電磁兼容性要求 第1部分:通用要求》

GB/T 18268.26

《測量、控制和實驗室用的電設備 電磁兼容性要求 第26部分:特殊要求   體外診斷(IVD)醫療設備》

YY/T 1155

《全自動發光免疫分析儀》

YY/T 1174-2010

半自動化學發光免疫分析儀

*注:如有其他新的適用國家標準和行業標準,應參照。

6.2指導原則

分類編碼

產品名稱

            文件名

發布或更新時間

管理類別

22-04-02

全自動化學發光免疫分析儀

全自動化學發光免疫分析儀技術審查指導原則

2015/12/3

22-04-02

半自動化學發光免疫分析儀

半自動化學發光免疫分析儀注冊技術審查指導原則(2016年修訂版)

2016/2/19

 

分享到:

來源:CIRS-MD

月宫游戏